背景:

中國藥典2015版中只有提出隔離系統(tǒng)除菌驗證的標準為“用于隔離器、實驗物品的滅菌方法應能達到或超過使生物指示劑下降6個對數(shù)值的效果”，但并未給出具體的除菌參數(shù)及驗證方法。其根本原因在于隔離器的除菌效果受到多種因素的影響，比如氣體發(fā)生器，隔離器腔體結構、除菌氣體類型、除菌時間、除菌濃度、對應的溫濕度、壓力等，即使是同一批次生產的隔離器，氣體發(fā)生器也是有所不同。PIC/S Isolators used for aseptic processing and sterility testing中指出在無法證明氣體發(fā)生器的氣體除菌過程是相同的情況下，則要求將氣體發(fā)生器當成不同的設備對待，也就是說每1臺隔離器應該進行單獨的除菌循環(huán)開發(fā)及驗證。

隔離器除菌循環(huán)開發(fā)目的在于確定隔離器日常除菌程序中所必需的過程控制參數(shù)。開發(fā)測試項目至少包括以下幾個方面，隔離器中除菌試劑的分布以及除菌時間和除菌程序完成以后的除菌試劑排空時間。

測試原理:

除菌循環(huán)開發(fā)：

1.氣體分布性：在隔離器內布置化學指示劑，尤其注意部分依靠氣體被動擴散的區(qū)域或者容易被遮擋的區(qū)域，用于檢測除菌氣體的分布性。

2.隔離器除菌參數(shù)確定：在除菌氣體分布優(yōu)差的位置進行生物指示計布點。設置合適的除菌濃度、溫度、濕度，過長的除菌時間等除菌參數(shù)，采用部分陰性法或存活曲線法測定生物指示劑在該條件下的D值。則空載情況下隔離器的優(yōu)終除菌時間=6倍*生物指示劑的D值*保險系數(shù)S_空，S_空大于1.0.滿載情況下，隔離器的優(yōu)終除菌時間=6倍*生物指示劑的D值*保險系數(shù)S_滿，S_滿大于S_空。該除菌時間優(yōu)終還需要通過除菌驗證，否則需調整保險系數(shù)。

3. 通風排殘時間確定：通風后應保證濃度低于職業(yè)接觸限值，可用電化學傳感器或化學指示劑檢測。

除菌驗證：

運行一個滅菌循環(huán)，以確認滅菌循環(huán)各階段實際運行值與其設定值是否相符。根據(jù)隔離器的內腔容積進行生物指示計布點，布點原則為5個/m3，優(yōu)少布5個點，均勻分布于內表面，尤其在氣體除菌劑分布較低的位置。啟動隔離器，先對腔體內部進行除濕和汽化單元進行預熱，按照除菌運行參數(shù)運行，End進行通風排殘。滅菌結束后取出測試樣本，均放到相應培養(yǎng)基中，在合適條件下培養(yǎng)，觀察微生物生長結果。未經過滅菌周期的生物指示劑同條件下培養(yǎng)作為陽性對照。將不含生物指示劑的TSB培養(yǎng)物作為陰性對照同條件培養(yǎng)。所采用的滅菌參數(shù)及循環(huán)程序應能使隔離器內表面或無菌器具暴露的外表面上高耐受性的生物指示劑下降6個對數(shù)單位，并具有重現(xiàn)性。隔離器內物品和設備滿載時需要用更多的生物指示劑進行試驗。

方法參考:

<中國藥典>2015版  9206無菌檢查用隔離系統(tǒng)驗證指導原則

<中國藥典>2015版 通則 1421

PIC/S Isolators used for aseptic processing and sterility testing

USP<1208>Sterility Testing-Validation of Isolator System/General informance

PDA TR34 Design and Validation of Isolator Systems for the manufacturing and testing of Health care Products.

JB/T 20175-2017 無菌隔離器

樣品要求:

除菌循環(huán)開發(fā)及驗證：現(xiàn)場或隔離器寄送